影响酶促反应速度的因素主要有以下几个方面。

底物浓度对酶促反应速度有着重要影响。在酶量恒定的情况下，当底物浓度较低时，反应速度随底物浓度的增加而急剧上升，两者成正比关系，反应为一级反应。随着底物浓度的进一步增加，反应速度不再呈正比例增加，反应速度增加的幅度不断下降。当底物浓度达到一定程度后，反应速度达到最大值，此时再增加底物浓度，反应速度也不再增加，反应为零级反应，这是因为酶已被底物饱和。

酶浓度也是影响因素之一。当底物浓度大大超过酶浓度，使酶被底物饱和时，反应速度与酶浓度变化成正比。酶浓度越高，单位时间内催化底物转化为产物的量就越多，反应速度也就越快。

温度对酶促反应速度的影响具有双重性。在较低温度范围内，随着温度升高，酶促反应速度加快，因为温度升高可增加分子的热运动，使底物与酶活性中心的碰撞机会增多。但当温度升高到一定程度时，酶开始变性失活，反应速度随温度升高而降低。酶促反应速度最快时的环境温度称为酶促反应的最适温度。

pH值同样会影响酶促反应速度。酶分子中的许多极性基团在不同的pH条件下解离状态不同，酶活性中心的某些必需基团需要在某一解离状态下才容易和底物结合并具有最大的催化活性。此外，许多具有可解离基团的底物和辅酶的荷电状态也会受pH影响，从而影响酶对它们的亲和力。而且，pH也会影响酶活性中心的空间结构，从而影响酶的活性。酶催化活性最高时的环境pH称为酶促反应的最适pH。

抑制剂能够降低酶促反应速度。抑制剂分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂。不可逆性抑制剂通常与酶活性中心的必需基团共价结合，使酶失活，这种抑制作用不能用透析、超滤等方法去除。可逆性抑制剂与酶非共价结合，通过与底物竞争结合酶的活性中心或结合在活性中心以外的调节位点而影响酶的活性，可通过透析、超滤等方法去除。

激活剂可以提高酶促反应速度。凡是能使酶由无活性变为有活性或者使酶活性增加的物质称为酶的激活剂。激活剂大多为金属离子