中药/药学理论

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高效液相色谱法基本原理

  1.基本概念

  色谱峰参数:峰高或峰面积(用于定量),峰位(保留值表示,用于定性),峰宽(用于衡量柱效)

  保留值:保留时间、死时间、调整保留时间

  峰宽:标准差、半峰宽、峰宽

  2.塔板理论:把组分在两相间的连续转移过程,分解为间歇的在单个塔板中的分配平衡过程

  理论塔板数 n=5.54(tr/wh/2)2

  色谱柱的理论塔板数越多,柱效越高;同样长度中塔板高度越小,柱效越高。

  3.速率理论:主要说明使色谱峰扩张而降低柱效的因素

  范氏方程 h=a b/μ cμ

  a为涡流扩散项。采用适当粒度、均匀的填料并填充均匀可减小涡流扩散

  b为纵向扩散系数。流动相为液体,柱温为室温,b/μ可忽略不计

  c为传质阻抗系数。在能完全覆盖载体表面的前提下,应适当减少固定液用量。

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