方法名称:菝葜-薯蓣皂苷元的测定-高效液相色谱法
应用范围:本方法采用高效液相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元的含量。
本方法适用于百合科植物菝葜SmilaxchinaL.的干燥根茎。
方法原理:本品加乙醇在索氏体取器中加热回流,回收溶剂浓缩加盐酸加热回流,冷却液加石油醚振摇,提取液蒸干,残渣加乙腈溶解并定容,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长203nm处检测薯蓣皂苷元的吸收值,计算出其含量。
试剂:1.乙腈;2.乙醇;3.盐酸;4.石油醚医|学教育网搜集整理。
仪器设备:
1仪器
1.1高效液相色谱仪
1.2色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按薯蓣皂苷元峰计算应不低于8000.
1.3紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:乙腈水=9010
2.2检测波长:203nm
2.3柱温:35℃
试样制备:
1.称取供试品
精密称定本品粉末(过二号筛)8g,为供试品。
2.对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷元对照品适量,加乙腈制成每1mL含0.2mg的溶液。
3.供试品溶液的制备
取本品粉末(过二号筛)约8g,精密称定,置索氏提取器中,加乙醇适量,浸渍过夜,加热回流至提取液近无色,回收溶剂至约100mL,加盐酸16mL,加热回流水解2小时,冷却,用石油醚(60~90℃)振摇提取4次,每次40mL,合并提取液,回收溶剂至干,残渣加乙腈溶解并转移至10mL量瓶中,加乙腈至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。
操作步骤:
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长203nm处测定薯蓣皂苷元(C27H42O3)的峰面积,计算出其含量。
参考文献:中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p216.