黄酮类化合物的柱色谱分离法:
分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶及纤维素粉等。
1.硅胶柱色谱:主要适用于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化(或乙醚化)的黄酮及黄酮醇类。
2.聚酰胺柱色谱:对分离黄酮类化合物来说,聚酰胺是较为理想的吸附剂。医学教|育网收集整理其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。
黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下述规律:
①苷元相同,洗脱先后顺序一般是:参糖苷、双糖苷、单糖苷、苷元。
②苷元母核上增加羟基,洗脱速度相应减慢。
③不同类型黄酮类化合物,洗脱先后顺序一般是:异黄酮、二氢黄酮、黄酮、黄酮醇。
④分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附,故查耳酮比相应的二氢黄酮难于洗脱。
3.葡聚糖凝胶柱色谱:分离游离黄酮时,主要靠吸附作用,苷元的羟基数目越多,越难以洗脱;分离黄酮苷时,则分子筛的性质起主导作用,苷的分子量越大,其上联结糖的数目越多,越容易洗脱。