测定方法

目的用气相色谱法测定盐酸金霉素中乙醇的残留量。方法采用80～90目的HayeSEPQ固定相，异丙醇为内标物，用内标法测定盐酸金霉素中残留乙醇的含量。结果该方法在乙醇浓度范围0.1～1.0mg/ml内呈良好的线性关系，响应曲线相关系数为0.9979，平均回收率为96.8%，变异系数为1.86%。结论本法简便，灵敏度高，可有效地用于盐酸金霉素的质量控制。

盐酸金霉素在精制过程中需加入溶媒乙醇，残留乙醇的浓度若过高将对人体造成不同程度的损害，为了控制乙醇在盐酸金霉素中的含量，保证产品的安全可靠性，我们将盐酸金霉素中残留乙醇的含量≤0.5%作为内控标准。

仪器与试药

仪器日本岛津GC-14B气相色谱仪，江申色谱工作站;1ml，10μl进样器;

试药盐酸金霉素（福州抗生素集团有限公司，批号为20010530）;乙醇（AR）、异丙醇（AR）、去离子水;双蒸水。

色谱条件与系统适用性

色谱柱2m×3mm的固定相为HayeSEPQ80～90目的不锈钢柱，柱温150℃;检测器:氢焰检测器;气化温度:180℃;载气:N2;压力:100kpa;进样量:1ul;乙醇、异丙醇的分离度R≥1.5;方法:内标法。

计算公式f=（Ai×dr）/（Ar×di）;Ms%=（f×As×di）/（Ai×W）;其中dr、di分别为乙醇、异丙醇的密度;Ar、Ai、As分别为标准乙醇、异丙醇、残留乙醇的峰面积，dr=0.7893，di=0.7855。

标准溶液与供试品溶液的制备

标准溶液的制备用1ml的吸量管分别准确吸取1ml乙醇和异丙醇放入盛有少量去离子水的1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

供试品溶液的制备

用1ml吸量管准确取异丙醇1ml放入盛有少量蒸馏水的1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

在安瓿中，准确称取约50mg盐酸金霉素样品，用1ml注射器加入（3.2.1）所配制溶液1ml，快速将安瓿封口，置于水浴中，加热煮沸数分钟至样品完全溶解，取出并冷却。

方法学考察

最佳固定相选择使用15%PEG-2CM白色填料（60～80目）进行测试条件摸索，柱温60℃，样品没有响应信号，柱温升高虽有响应信号，但灵敏度太低，达不到色谱要求，无法测定微量溶媒。使用HayeSEPQ80～90目效果较好。。

定量限试验在（2.1）色谱条件下，基线稳定后，计算基线噪音水平;配制系列浓度梯度溶液进样，以响应峰高约10倍基线噪音的试液浓度为该方法定量限。在定量限浓度处，连续进样6次，计算响应峰面积的相对标准偏差。

表1响应峰面积的相对标准偏差

表2乙醇响应峰面积与浓度之间相关系数及线性范围

注:曲线方程为:Y=122271X-565.2

线性关系分别配制0.1mg/ml，0.15mg/ml，0.20mg/ml，0.25mg/ml，0.30mg/ml，0.40mg/ml的标准乙醇溶液，在（2.1）色谱条件下，各进样1.0μl记录谱图，以浓度C横坐标，以峰面积A为纵坐标，计算乙醇响应峰面积与浓度之间相关系数及线性范围。

精密度试验分别吸取（3.1）制备液1.0μl，分别进样6次，计算乙醇/异丙醇的RSD。

回收率试验分别准确吸取1μl，2μl，3μl，4μl，5μl的AR乙醇溶液，分别加入到已知浓度盐酸金霉素中测定其回收率。

实验结论

经过试验，使用HayeSEPQ80～90目测定微量溶媒灵敏度较高。本法操作简便，分析快速准确，重现性好，回收率高。