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氨基糖苷类可与细菌核糖体结合，干扰细菌蛋白质合成的全过程：
①与30S亚基结合以及在mRNA起始密码子上，通过固定30-50S核糖体复合物而干扰蛋白质合成的起始阶段。
②与30S亚基结合引起mRNA错译，导致翻译过早终止，产生无意义的肽链。
③形成错误的氨基酸，导致无功能蛋白质的产生。这些异常蛋白质可能插入细胞膜，导致通透性改变，并进一步加速氨基糖苷类转运。该类药物有抗生素后效应。
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