高效液相色谱法(HPLC)是一种重要的分离分析方法,广泛应用于药物的定性与定量分析。其基本原理是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配行为的不同来实现分离。
1. 固定相:是指装填在柱内的固体物质或涂布于载体上的液体或高分子膜。它对样品中的不同成分具有不同的亲合力。
2. 流动相:是推动样品通过色谱柱的溶剂,可以是单一的溶剂也可以是由多种溶剂组成的混合物。
当待测药物随流动相进入装有固定相的色谱柱时,由于药物分子与固定相之间的作用力(如疏水作用、氢键作用、离子交换等)不同,在通过色谱柱的过程中会被不同程度地滞留。因此,各组分在柱内的运行速度也就不同,从而达到分离的目的。
检测器位于色谱柱的出口处,可以连续监测流出物中的物质变化,并将这些信息转换成电信号记录下来形成色谱图。根据保留时间、峰面积等参数与标准品进行比较,即可实现对药物成分的定性和定量分析。
高效液相色谱法具有分离效率高、速度快、灵敏度好等特点,在药品的质量控制中发挥着重要作用。