灭菌效果验证的主要指标是确保所有微生物，包括细菌、病毒、真菌及其孢子等都被完全杀灭或去除。具体来说，常用的指标包括：
1. 无菌检测：这是最直接的验证方法，通过取样后培养，观察是否有微生物生长来判断灭菌是否彻底。
2. 生物指示剂法：使用对特定灭菌条件有高度抵抗力的生物指示剂（如嗜热脂肪芽孢杆菌孢子），经过灭菌处理后再进行培养，如果指示剂不生长，则说明达到了预期的灭菌效果。
3. 化学指示剂法：利用化学物质在受热、辐射等条件下会发生颜色变化或其它物理特性改变的特点来间接反映灭菌过程的有效性。虽然不能直接证明微生物被杀灭，但可以作为灭菌过程是否完成的一个参考依据。
4. 物理参数监测：如温度、压力、时间等关键控制点的记录和监控，确保这些条件满足了达到有效灭菌所需的物理标准。
以上几种方法通常会结合使用以全面评估灭菌效果。
