强心苷正性肌力机制主要与抑制心肌细胞膜上的钠 - 钾 - ATP 酶有关。心肌细胞膜上存在钠 - 钾 - ATP 酶，它的主要功能是将细胞内的钠离子泵出细胞外，同时将细胞外的钾离子泵入细胞内，以维持细胞内外钠、钾离子的正常浓度梯度。

当强心苷与钠 - 钾 - ATP 酶结合并抑制其活性时，细胞内钠离子的外流减少，导致细胞内钠离子浓度升高。由于细胞内外钠离子浓度差减小，钠 - 钙交换体的活动发生改变。钠 - 钙交换体是一种依赖于钠浓度梯度进行钙离子转运的蛋白，正常情况下，它利用细胞内外钠离子的浓度差将细胞内的钙离子排出细胞外。当细胞内钠离子浓度升高时，钠 - 钙交换体向细胞外转运钠离子的动力减弱，而向细胞内转运钙离子的作用相对增强，使得更多的钙离子进入细胞内。

进入细胞内的钙离子增加，会使心肌收缩蛋白（如肌动蛋白和肌球蛋白）之间的相互作用增强，从而增加心肌的收缩力，表现为正性肌力作用。此外，细胞内钙离子浓度升高还能促进肌浆网摄取和储存更多的钙离子，在下次心肌兴奋收缩时，能释放出更多的钙离子，进一步增强心肌收缩力。

强心苷的正性肌力作用具有使心肌收缩更加敏捷、收缩期缩短、舒张期相对延长的特点。舒张期延长有利于静脉血回流，增加心输出量，同时心肌耗氧量并不增加甚至有所降低，这对于心力衰竭的治疗具有重要意义。