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Edman降解法-公卫执业助理医师复习资料

2015-08-11 15:58 来源:医学教育网

公卫执业助理医师考试中的科目繁多,医学教育网小编整理了考试中的部分内容,希望对参加考试的考生有所帮助。

这是目前用于顺序分析的最主要的方法。它的原理是从N端开始,逐步降解。将肽先与异硫氰酸苯酯(PTH试剂)在pH8-9条件下作用,肽的NH2末端接到异硫氰酸苯酯的C原子上生成苯异硫甲氨酰肽,简称PTC肽,在强酸作用下,可使靠近PTC基的氨基酸环化,肽键断裂形成苯氨基噻唑啉酮衍生物和一个失去末端氨基酸的肽链。此肽不被破坏,因而又可出现一个新的N-末端。重复以上的步骤,继续与PTH试剂作用,继续分析,苯氨基噻唑啉酮衍生物很容易由有机溶剂抽提出来进行鉴定。但此衍生物很不稳定,在水中可转化为稳定的乙内酰苯硫脲氨基酸(PTH-氨基酸)。这些步骤通常称为Edman氏逐步降解法。所以可用来测定氨基酸的排列顺序。Edman降解法的优点是样品用量少,灵敏度高。

PTH-氨基酸的鉴定可以用各种层析方法,如纸层析、薄层层析、气相层析和质谱法等,现在多用高压液相层析法。虽然此方法具有很多优点,但是由于操作繁琐,工作量大,所以目前有人根据Edman降解的原理作一系列改进。


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