用品及准备
抗Lea、抗Leb试剂血清,待检者5%红细胞悬液和已知Le(a+b-)、Le(a-b+)的5%红细胞悬液,其他材料同ABO血型鉴定。
方法及内容
1.取6支小试管排成2排,第1排(单号)及第2排(双号)试管分别标以待检者、Lea和Leb对照字样。
2.将抗Lea血清1滴分别加入单号管内,抗Leb血清1滴加入双号管内。
3.按标记各加待检者、已知Le(a+b-)和Le(a-b+)的5%红细胞悬液1滴。
4.混匀,3000r/min离心15s。
5.斜持试管轻轻晃动观察红细胞有无凝集。
结果判读:先看Lea对照,应单号试管凝集,双号试管不凝;Leb对照应双号试管凝集,单号试管不凝。待检者单号试管凝集,为Le(a+b-)型,双号试管凝集为Le(a-b+)型;单、双号试管均凝集为Le(a+b+);单、双号试管均不凝集者为Le(a-b-)型。若出现弱反应,应作间接抗人球蛋白试验。
注意事项
1.血清中存在丰富的Lewis物质,在体外可在定型时被中和,故须洗涤红细胞方可定型。
2.Lewis抗体在盐水中凝集红细胞凝集块易碎,取出试管不宜摇动,以免出现假阴性。
3.采用高效价单克隆抗Lea、抗Leb血清试剂定型以免遗漏Le(a+b+)血型。