免疫学检测常用方法有多种,它们在临床诊断、科研等领域发挥着重要作用。
首先是凝集反应,这是一种经典的免疫学检测方法。它基于颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体结合,在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。常见的有直接凝集反应和间接凝集反应。直接凝集反应可用于血型鉴定、细菌鉴定等,比如ABO血型鉴定就是利用红细胞表面的抗原与相应抗体发生凝集来确定血型。间接凝集反应则是将可溶性抗原或抗体吸附在载体颗粒上,再与相应抗体或抗原反应,可用于检测某些病毒抗体、自身抗体等。
沉淀反应也是常用方法之一。它是可溶性抗原与相应抗体在合适条件下结合,形成肉眼可见的沉淀物。包括单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳等。单向免疫扩散常用于检测血清中免疫球蛋白、补体等成分的含量;双向免疫扩散可用于抗原抗体的纯度鉴定、分析抗原抗体的相对含量等;免疫电泳则结合了电泳技术和免疫扩散,能更精细地分析抗原成分。
免疫标记技术是一类灵敏度高、应用广泛的检测方法。其中酶免疫测定,常用的有酶联免疫吸附试验(ELISA),它利用酶标记抗体或抗原,通过酶催化底物显色来检测相应的抗原或抗体,可用于检测病原体抗体、肿瘤标志物等。免疫荧光技术是用荧光素标记抗体,通过荧光显微镜观察荧光信号来定位和检测抗原,在细胞表面抗原检测、组织切片中抗原定位等方面应用较多。放射免疫测定则是用放射性核素标记抗原或抗体,具有灵敏度极高的特点,常用于检测微量物质,如激素、药物等。
此外,流式细胞术也是重要的免疫学检测手段。它可以快速、准确地对单个细胞或生物颗粒的多种特性进行多参数定量分析和分选,在淋巴细胞亚群分析、白血病和淋巴瘤的免疫分型等方面有重要应用。免疫印迹法能将蛋白质电泳分离后转移到固相载体上,再用抗体进行检测,常用于检测病毒蛋白、自身抗体等。