在临床上,III型超敏反应是指由可溶性抗原与特异性抗体结合形成的中等大小的免疫复合物(ICs)沉积于组织中引发的一系列炎症反应。检测循环中的免疫复合物对于诊断和评估III型超敏反应相关疾病具有重要意义。以下是几种常用的检测方法:
1. 聚乙二醇沉淀法:聚乙二醇可以降低水相溶剂的介电常数,从而促进免疫复合物的聚集并使其从溶液中沉淀出来。通过离心收集沉淀物,并进行进一步分析。
2. 补体结合试验:利用补体系统在免疫复合物形成过程中被激活的特点来间接检测ICs。当血清中的免疫复合物与红细胞表面抗原发生反应时,会消耗掉一部分C3b成分,导致后续的溶血反应减弱或消失。根据这种变化可判断样本中是否存在高水平的循环免疫复合物。
3. C1q固相试验:基于C1q对免疫复合物具有高度亲和力这一特性设计而成。将抗原包被于固相载体上,加入待测血清后若含有相应抗体则会形成ICs;再添加标记有酶的C1q,通过显色反应来检测ICs的存在。
4. 免疫比浊法:该方法利用免疫复合物在特定波长下具有一定的光散射特性。将抗原与待测血清混合后,在一定条件下让其充分反应形成ICs;然后测定其在特定波长下的吸光度值,以此反映血清中循环免疫复合物的含量。
5. 流式细胞术:通过对荧光标记抗体的使用,可以直接检测单个细胞表面或者内部存在的免疫复合物。此方法具有高灵敏度和特异性,并且可以同时分析多个参数。
6. ELISA法:利用酶联免疫吸附技术,通过特定抗体捕获血清中的循环免疫复合物并进行定量测定。
以上这些方法各有优缺点,在实际应用中需要根据实验室条件、样品类型以及检测目的选择合适的方法。