在急性早幼粒细胞
白血病(Acute Promyelocytic Leukemia, APL)中,PML-RARA融合基因的检测是诊断和监测疾病进展的重要手段。目前常用的检测方法有:
1. 荧光原位杂交技术(FISH):这是一种基于染色体水平的分子生物学技术,能够直观地显示PML和RARA基因之间的易位情况。该方法操作简便、结果易于解读,适用于临床快速筛查。
2. 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR):通过提取患者样本中的RNA,经过逆转录成cDNA后,利用特异性引物扩增PML-RARA融合基因片段。此技术灵敏度高、特异性强,能够检测出微量的融合基因表达。
3. 实时荧光定量PCR(qRT-PCR):在RT-PCR的基础上结合实时荧光监测系统,可以准确定量样本中PML-RARA融合基因的拷贝数或转录水平。对于评估治疗效果及预测复发具有重要意义。
4. 基因测序技术:包括传统的Sanger测序和新一代高通量测序(NGS)。前者适用于已知突变位点的验证,后者则能全面检测PML-RARA融合基因及其变异形式,尤其适合复杂病例或研究目的。
5. 液相芯片技术:如Luminex xMAP技术等,可以同时检测多种标志物,包括PML-RARA融合蛋白。此方法具有高通量、快速和准确的特点,在临床应用中也逐渐增多。
以上就是APL中PML-RARA融合基因的主要检测方法,选择合适的检测手段需要根据实验室条件、样本类型以及具体的临床需求来决定。