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生物素-亲和素系统在免疫检测中作用?

生物素-亲和素系统是免疫检测技术中的一个重要工具,它利用了生物素(也称为维生素H或B7)与亲和素之间极高的结合特异性。这种结合的强度远高于抗体与其抗原之间的相互作用,因此在提高检测灵敏度方面具有显著优势。
1. 增强信号放大:在免疫检测中,可以通过将生物素标记到抗体上来实现对目标分子的识别。当这些生物素化的抗体与目标分子结合后,加入亲和素-酶复合物或荧光标记的亲和素,由于一个亲和素分子可以同时结合多个生物素分子,从而形成多级放大效应,大大提高了检测信号。
2. 提高灵敏度:因为生物素与亲和素之间的高亲和力(解离常数约为10^-15mol/L),即使目标物质浓度很低也能被有效识别,因此该系统能够帮助实现更低检出限的测定。
3. 减少非特异性结合:通过使用高度纯化的生物素和亲和素试剂,可以显著降低背景干扰,提高检测结果的准确性。此外,在某些情况下,还可以利用链霉亲和素替代普通亲和素来进一步优化性能,因为前者在生理条件下更稳定且与生物素的结合更为特异。
4. 灵活应用于多种检测平台:此系统不仅适用于传统的ELISA等液相免疫测定方法,也可以整合到流式细胞术、荧光显微镜观察等多种技术平台上,为科学研究和临床诊断提供了极大的便利性。

综上所述,生物素-亲和素系统在提高免疫检测的灵敏度、特异性及灵活性方面发挥着重要作用。
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