杂交瘤技术的核心步骤主要包括以下几个方面：
1. 免疫动物：选择适当的实验动物（如小鼠），通过注射特定抗原使动物产生免疫反应，从而在体内形成能够识别该抗原的B淋巴细胞。
2. 融合细胞：将上述免疫后的脾脏中提取出的B淋巴细胞与一种可以无限增殖但自身不能分泌抗体的骨髓瘤细胞进行融合。通常使用聚乙二醇（PEG）作为促融剂来促进两种细胞之间的融合过程，形成杂交瘤细胞。
3. 筛选克隆：将融合后的混合细胞接种到选择性培养基中，只有成功融合形成的杂交瘤细胞才能生存并增殖。通过有限稀释法或其他方法筛选出能够稳定分泌所需单克隆抗体的单一细胞系（即克隆）。
4. 扩增与纯化：对筛选出来的阳性克隆进行扩增，并采用适当的方法从培养上清或小鼠腹水中提取和纯化目标单抗。
5. 鉴定与应用：最后，需要对抗体的特异性、亲和力等性质进行全面鉴定，确保其符合预期要求后方可用于科研或临床检测等领域。
