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分光光度计如何测定样本浓度?

分光光度计是一种常用的实验室仪器,它通过测量特定波长下溶液对光线的吸收来确定溶液中物质的浓度。下面是使用分光光度计测定样本浓度的基本步骤:
1. 准备标准品和样品:根据需要检测的物质性质,配制一系列已知浓度的标准溶液,并准备好待测样品。
2. 选择合适的波长:不同的物质在不同波长下有最大的吸收值,这个最大吸收值称为该物质的最大吸收峰。根据所测定物质的特点,选择合适的工作波长进行测量。
3. 零点校准:使用空白对照液(通常为蒸馏水或不含目标成分的溶剂)调整仪器至零吸光度,以消除背景干扰的影响。
4. 测量标准品和样品的吸光度值:将每个标准溶液及待测样液分别放入比色皿中,在选定波长下读取其吸光度值。记录数据时注意保持温度等条件一致。
5. 绘制标准曲线:以标准溶液浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标绘制直线或曲线图即为标准曲线。如果样品的测量结果落在标准曲线范围内,则可以通过插值法计算出样品中目标物质的实际浓度;若超出范围则需稀释后再测。
6. 计算样品浓度:根据所得到的标准曲线和待测样液的吸光度值,可以求得未知样本的具体浓度。如果样品经过了稀释处理,在最终结果中还需乘以相应的稀释倍数来获得原始浓度。

通过以上步骤,即可利用分光光度计准确地测定出溶液中目标物质的浓度。在实际操作过程中还需要注意仪器维护保养、正确选择比色皿材质等因素,确保测量结果的准确性与可靠性。
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