化学发光免疫分析是一种高灵敏度的免疫测定技术,它结合了免疫反应的特异性和化学发光的高度敏感性。其基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性结合反应,并将这种生物反应与化学发光过程偶联起来,通过测量产生的光强度来定量目标物质。
具体来说,在化学发光免疫分析中,首先需要制备标记有发光剂的一方(即抗原或抗体)。当样品中的待测物(另一个抗原或抗体)与之发生特异性结合后形成复合物。随后加入适当的化学试剂引发发光反应。这个过程中产生的光强度与待测物质的浓度成正比,通过检测仪器测量发出的光线强度即可计算出样本中目标分子的具体含量。
整个过程包括了以下几个关键步骤:
1. 标记:选择合适的发光标记物对其中一个免疫成分进行标记。
2. 结合:让标记后的免疫成分与样品中的待测物质发生特异性结合。
3. 分离:如果需要,可以采取措施将未结合的标记物从复合物中分离出去。
4. 检测:加入化学发光底物引发反应,并使用光度计等设备测量产生的光线强度。
5. 计算:根据标准曲线和实际测得的数据计算样品中的待测物质浓度。
由于其高灵敏度、快速简便以及可自动化操作等特点,化学发光免疫分析在临床诊断中得到了广泛应用。