在生化检测中,比色法是一种常用的定量分析方法。其基本原理是基于溶液颜色与浓度之间的关系,即朗伯-比尔定律(Lambert-Beer Law)。当一束单色光通过有色溶液时,部分光线会被溶液中的特定物质吸收,而透射光的强度会随着溶液中该物质浓度的增加而减弱。这种关系可以用以下公式表示:A = εbc
其中,A代表吸光度(Absorbance),ε是摩尔吸光系数,b是比色皿的厚度,c则是待测物质的浓度。
在实际操作中,我们首先需要制备一系列已知浓度的标准溶液,并测量它们在特定波长下的吸光值。然后根据这些数据绘制标准曲线。接下来,将未知样品与显色剂反应后,在相同条件下测定其吸光度。最后通过比较或查找标准曲线来确定样品中的目标物质浓度。
比色法操作简便、成本低廉且灵敏度较高,适用于多种生化指标的检测,如血糖、血脂等。