单克隆抗体制备的核心步骤主要包括以下几个方面：
首先是免疫动物，选择合适的动物（如小鼠）注射特定的抗原物质，以刺激其体内产生针对该抗原的特异性抗体。
然后是细胞融合，从免疫后的动物脾脏中提取B淋巴细胞，并与骨髓瘤细胞进行融合。通过使用聚乙二醇等促融剂来促进两种细胞之间的融合，形成杂交瘤细胞。
接着是筛选和克隆化，将上述获得的杂交瘤细胞接种到选择性培养基（如HAT培养基）中，只有成功融合且具有无限增殖能力的杂交瘤细胞能够存活并生长。通过有限稀释法或软琼脂平板法等技术对阳性克隆进行筛选和纯化。
最后是单抗生产与鉴定，将经过多轮筛选得到的分泌目标抗体的单一杂交瘤细胞系扩大培养，并采用体内（腹腔注射）或体外（悬浮培养）方式大量制备单克隆抗体。同时，还需对抗体的特异性、亲和力等性质进行详细分析。
这些步骤共同构成了单克隆抗体制备的基础流程。
