化学发光法是一种利用化学反应产生的光来检测目标物质的方法。在检测巨噬细胞活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）时，通常会采用一种能够与ROS发生特异性反应并产生光的探针或底物。当这种探针或底物与巨噬细胞内的ROS接触后会发生化学反应，并发出荧光或者光信号，通过测量发光强度就可以间接反映巨噬细胞内ROS水平。

具体步骤如下：
1. 准备样本：将待测的巨噬细胞悬液准备好，确保细胞状态良好且浓度适宜。
2. 加入探针：向细胞悬液中加入特定的化学发光探针。这些探针通常对ROS有高度敏感性和选择性。
3. 孵育反应：让细胞与探针充分接触并孵育一定时间，使探针能够进入细胞并与ROS发生作用。
4. 检测发光信号：使用化学发光检测仪或其他合适的设备测量由ROS引发的发光强度。发光强度通常与ROS浓度成正比关系。
5. 数据分析：根据标准曲线或对照组的数据来计算样品中ROS的实际含量。

这种方法具有较高的灵敏度和特异性，适用于快速准确地测定巨噬细胞内的活性氧水平，在研究炎症反应、免疫功能等方面有着广泛的应用价值。