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微生物学实验室中,通过生化试验鉴定志贺菌属是一项重要的技能。志贺菌属是一类革兰氏阴性杆菌,能够引起人类细菌性痢疾。以下是常用的几种生化试验方法来帮助鉴定志贺菌:
1. 动力观察:志贺菌是无鞭毛的非运动菌,可以在半固体培养基上进行动力测试以确认此特征。
2. 乳糖发酵试验:将疑似菌株接种到乳糖发酵管中,在37摄氏度下孵育24小时。志贺菌不发酵乳糖,因此不会产酸产气,而对照的阳性对照(如大肠埃希菌)则会产酸产气。
3. 葡萄糖发酵试验:虽然志贺菌不能发酵乳糖,但它们可以分解葡萄糖产生酸而不产气。通过使用含有酚红指示剂的葡萄糖发酵管来检测这一特性。
4. 尿素酶试验:将细菌接种到含尿素的培养基中并孵育24-48小时。志贺菌属成员阴性,即不能分解尿素产生氨,而某些其他肠道杆菌如变形杆菌则为阳性反应。
5. 甲基红和V-P(Voges-Proskauer)试验:这两个测试用于评估细菌代谢产物的性质。志贺菌在甲基红试验中通常呈阳性(红色),表明其能够产生足够的酸来降低培养基pH值;而在V-P试验中则为阴性(无颜色变化或淡黄色),说明它不积累大量乙醇酸。
6. 靛基质试验:此测试用于检测细菌是否能分解色氨酸生成靛基质。志贺菌属成员通常为阴性反应,即不会有红色出现。
7. 硫化氢产生试验:通过观察三糖铁(TSI)斜面或含铁离子的培养基中是否有黑色沉淀来判断硫化氢的产生情况。志贺菌不产H2S,故在这些测试中应为阴性结果。
8. 动力-吲哚-尿素(MIU)试验:这是一个组合实验,可以同时评估细菌的动力、吲哚生成能力和尿素酶活性。对于志贺菌来说,预期的结果是无动力、不产生吲哚和不能分解尿素。
通过上述一系列生化反应的