评估免疫放射分析(Immunoradiometric Assay, IRMA)的灵敏度和特异性是确保其准确性和可靠性的重要步骤。下面分别介绍这两种性能指标的评估方法:
1. 灵敏度评估:
- 确定最低检测限:这是指能够可靠地从背景噪音中区分出信号的最低浓度,通常通过重复测量已知低浓度的标准样品来确定。如果多次测定的结果超过空白值(即不含目标物质的样品)3个标准差以上,则认为该浓度为方法的最低检测限。
- 评估线性范围下限:灵敏度还与线性响应区间的下限有关,需要验证在低浓度范围内是否能保持良好的线性和重复性。
2. 特异性评估:
- 交叉反应测试:选择一系列结构相似或功能相关的化合物作为干扰物进行测定,观察这些物质是否存在显著的信号响应。真正的特异性方法只应对目标分析物产生明显信号。
- 干扰实验:向样本中添加潜在的干扰物质(如溶血、黄疸等),检查它们是否会影响结果准确性。
- 回收率试验:将已知浓度的目标分子加入到不含该分子的真实临床样品中,然后使用IRMA测定总含量。通过比较实际测量值与理论预期值之间的差异来判断是否存在非特异性结合或损失。
综上所述,在评估免疫放射分析的灵敏度和特异性时,需要综合考虑最低检测限、线性范围下限以及交叉反应性和干扰物质的影响等因素。这些信息有助于全面了解方法学特性,并指导其在实际应用中的正确使用。