骨髓涂片的制备是临床血液学检查中的一个重要环节,它的主要目的是观察骨髓细胞的形态特征。以下是骨髓涂片制备的基本步骤:
1. 准备材料和工具:包括清洁干燥的玻片、酒精棉球、无菌手套等。
2. 选择合适的部位进行穿刺:通常选取髂后上棘作为穿刺点,因为这里的骨皮质较薄,易于操作且风险较小。对于儿童患者可能会选择胫骨前部。
3. 穿刺取材:在局部麻醉下,使用特制的骨髓穿刺针穿过皮肤和骨膜到达骨髓腔内,然后轻轻抽吸少量(约0.2-0.5ml)新鲜骨髓液。注意动作要轻柔以避免损伤组织。
4. 制备涂片:将吸取到的骨髓液滴于干净的载玻片中央,用另一块清洁的小玻片作为推片,从滴落点开始平行推进,形成均匀薄层分布的涂膜。要求动作迅速而平稳,确保细胞分散良好且不重叠。
5. 固定:将制备好的骨髓涂片立即放入甲醇中固定约1-3分钟,以防止细胞变形并有助于后续染色。
6. 染色:常用的染色方法有瑞氏染色或吉姆萨染色等。按照染液说明书要求的步骤进行操作,经过一系列处理后使细胞核和浆质着色明显。
7. 封片与观察:染色完成后用水冲洗掉多余的染料并自然晾干或者用吹风机低温吹干。最后可以使用中性树胶封固以便长期保存,并在显微镜下仔细观察骨髓细胞的形态学特征。
以上就是完整的骨髓涂片制备流程,每一步都需要严格遵守无菌技术和操作规范,以确保样本质量满足临床诊断需求。