临床医学检验职称

考试动态
复习指导
互动交流

单克隆抗体生产的关键步骤有哪些?

单克隆抗体生产的流程较为复杂,但可以概括为以下几个关键步骤:
1. 免疫动物:选择合适的动物(通常是小鼠),用目标抗原对其进行免疫注射,以刺激其体内产生特异性抗体。
2. 脾细胞与骨髓瘤细胞融合:从已免疫的动物脾脏中获取B淋巴细胞,并将其与肿瘤细胞(如骨髓瘤细胞)进行化学或生物方法诱导融合,形成杂交瘤细胞。这种细胞既具有无限增殖的能力又能够分泌特异性抗体。
3. 筛选阳性克隆:通过选择性培养基筛选出能稳定产生所需单抗的杂交瘤细胞株,并采用有限稀释法等技术进一步纯化得到单一细胞来源的克隆。
4. 扩增和保存杂交瘤细胞:将筛选出来的优质杂交瘤细胞在体外大规模培养,或者将其注射到小鼠腹腔内形成肿瘤以获得大量单抗。同时,可将部分细胞冻存起来备用。
5. 单克隆抗体的纯化与鉴定:从培养液或血清中提取单抗,并通过亲和层析、离子交换等方法进行纯化;然后利用ELISA、Western Blot等技术对抗体的特异性及效价进行检测确认。
6. 质量控制与稳定性测试:对制备好的单克隆抗体进行全面的质量评估,包括其物理化学性质、生物学活性以及长期保存条件下的稳定性能等方面的研究。

以上就是单克隆抗体生产的主要步骤,在实际操作过程中还需要严格遵守相关的实验规范和安全标准。
打开APP看资讯 更多更快更新鲜 >>
全部评论(0打开APP查看全部 >
精品课程

检验职称无忧实验班

报名/考试不过 按协议重学

1480

查看详情
0
0
0
评论
取消
复制链接,粘贴给您的好友

复制链接,在微信、QQ等聊天窗口即可将此信息分享给朋友
前往医学教育网APP查看,体验更佳!
取消 前往
您有一次专属抽奖机会
可优惠~
领取
优惠
注:具体优惠金额根据商品价格进行计算
恭喜您获得张优惠券!
去选课
已存入账户 可在【我的优惠券】中查看