生物素在免疫标记技术中扮演着重要角色，主要通过其与亲和素或链霉亲和素之间极高的结合特异性来实现。这种高亲和力使得生物素-亲和素系统成为一种非常有效的工具，在多种免疫检测方法中得到广泛应用。
1. 生物素化抗体：首先将生物素共价连接到特定的单克隆或多克隆抗体上，形成生物素化的探针。这个过程可以通过化学反应实现，如使用NHS酯或光敏生物素等活化形式的生物素与抗体上的氨基或其他功能基团结合。
2. 结合目标抗原：将上述制备好的生物素化抗体加入到含有待测样本（例如血清、组织切片）中，让其与目标抗原发生特异性免疫反应形成复合物。
3. 亲和素/链霉亲和素标记的酶或荧光染料：向体系中添加预先制备好的亲和素或链霉亲和素-酶（如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶）或者荧光素偶联物。由于生物素与亲和素之间存在极高的亲和力，因此可以迅速而稳定地形成“抗原-抗体-生物素-亲和素/链霉亲和素-标记物”复合体。
4. 显色或发光检测：最后通过添加底物溶液（对于酶标系统）或者使用荧光显微镜观察（对于荧光标记系统），根据产生的颜色变化或荧光信号强度来判断目标抗原的存在与否及其含量水平。

该技术不仅提高了检测的灵敏度和特异性，还简化了操作步骤，减少了背景干扰，在临床诊断、科学研究等领域具有广泛的应用前景。