制备单克隆抗体制备的主要步骤包括以下几个方面：
首先，免疫动物。选择适当的小鼠或其他动物进行特定抗原的免疫接种，目的是让小鼠体内产生针对该抗原的特异性抗体。
其次，细胞融合。从免疫过的小鼠脾脏中提取B淋巴细胞，并与骨髓瘤细胞（一种能够无限增殖但不能产生抗体的细胞）在促融剂的作用下进行融合，形成杂交瘤细胞。这些杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限分裂的能力，又保留了B淋巴细胞分泌特异性抗体的功能。
再次，筛选和克隆化。将上述获得的混合物接种到选择性培养基中，通过特定方法筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆化，即让每个克隆都由一个单一的杂交瘤细胞生长而来，确保产生的抗体具有高度均一性和特异性。
最后，扩大培养与纯化。对选定的杂交瘤细胞系进行大规模体外或体内扩增培养，收集含有单克隆抗体的上清液或小鼠腹水，并通过各种生物化学手段如盐析、层析等方法提纯目标单抗。
以上就是制备单克隆抗体的主要步骤。
