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流式细胞术原理是什么?

流式细胞术是一种能够对单个细胞或颗粒进行快速定量分析的技术,它通过检测荧光信号来获取关于细胞的各种信息。其基本原理是将待测样本中的细胞或微粒在流动液体中形成单一的细流,使每个细胞都能单独地、一个接一个地通过激光束。当细胞经过激光照射区时,会产生散射光和荧光。

散射光包括前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)。前向散射光主要反映细胞的大小信息;侧向散射光则与细胞内部结构复杂度相关。而荧光信号是通过标记特定抗体或染料来实现的,这些标记物能够特异性地结合到目标分子上,在受到激光激发后发射出不同波长的荧光。检测器可以区分不同的荧光颜色,并记录下来。

通过对散射光和荧光信号的数据分析,流式细胞术不仅可以测定细胞表面及内部特定抗原的存在与否、数量多少等信息,还能对细胞周期、凋亡状态以及DNA含量等多种生物学特性进行研究。这项技术在临床免疫学中应用广泛,如白血病分型、淋巴瘤诊断、HIV感染监测等方面都发挥着重要作用。
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