免疫电泳是一种将抗原与抗体结合反应和电泳技术相结合的方法,用于检测、鉴定以及定量分析体液中的蛋白质。其基本原理是利用电场作用下不同分子的迁移特性,使样品中各种成分按一定顺序分离,然后加入特异性抗体形成可见复合物来识别特定的抗原。
具体步骤如下:
1. 在凝胶板上点样含有待测抗原的样本。
2. 通过施加电流,带电荷的蛋白质在电场作用下向相反极移动并根据其分子量、形状及所携带净电荷的不同而被分离成多个条带或斑点。
3. 将凝胶板上的样品区域与预先制备好的含有特定抗体的沟槽相接触。
4. 在一定条件下,抗原和相应抗体发生特异性结合形成沉淀线。
5. 通过观察沉淀线的位置、形态等信息可以判断是否存在目标抗原以及其相对含量。
免疫电泳技术不仅能够检测出某些蛋白质的存在与否,还能提供关于这些蛋白质量的信息,在临床诊断中具有重要的应用价值。例如,它可以用于多发性骨髓瘤患者的M蛋白筛查和分类,以及其他多种疾病状态下的血清蛋白图谱分析。