在实验室中鉴定耶尔森菌属主要依赖于一系列生化测试和培养特性。以下是具体的步骤:
1. 初步筛选:首先,可以通过在选择性培养基上观察菌落形态来进行初步的筛选。例如,耶尔森菌可以在麦康凯(MacConkey)琼脂或SS琼脂上形成无色到浅黄色的小菌落,并且在CIN(Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin)琼脂上呈现红色菌落。
2. 生化特性检测:进一步的鉴定需要通过一系列生化测试来完成。耶尔森菌属细菌通常表现为:
- 非发酵乳糖
- 氧化酶阴性
- 触酶阳性
- 硫化氢产生(某些种如鼠疫耶尔森菌)
- V-P反应阴性
- 发酵葡萄糖和麦芽糖
3. 特异性试验:为了更准确地鉴定到种水平,可以进行以下特异性测试:
- 尿素酶活性测定:大多数耶尔森菌属细菌尿素酶阳性。
- 吲哚生成实验:部分种类产吲哚。
- 铁载体产生能力检测:如鼠疫耶尔森菌能产生铁载体。
- 对特定抗生素的敏感性测试,比如对庆大霉素和头孢西丁的反应。
4. 分子生物学方法:对于难以通过常规生化试验区分的菌株,可采用PCR等分子生物学技术进行基因序列分析以确定其种属。例如,可以检测与鼠疫耶尔森菌特异性的F1抗原相关的基因片段。
综上所述,在实验室中鉴定耶尔森菌属需要结合培养特性、生化反应以及可能的分子生物学手段来进行综合判断。