ELISA(酶联免疫吸附测定)检测原理是基于抗原与抗体之间的特异性结合反应。在ELISA中,可以利用两种主要类型的抗体反应:直接法和间接法。
1. 直接法:在这种方法中,标记了酶的单克隆或多克隆抗体直接与固定在固相载体上的目标抗原结合。这种方法简单快速,但是敏感度相对较低。
2. 间接法:这是更常用的ELISA形式。首先,未标记的特异性抗体(一抗)与固定的目标抗原结合;然后加入酶标二抗,这种二抗能够识别并结合到一抗上。通过这种方式可以放大信号,提高检测的敏感性和特异性。
无论是哪种方法,最终都会添加底物溶液,在有目标物质存在的情况下,酶会催化底物产生颜色变化或荧光等可测读的变化,从而实现对抗原或者抗体的定量分析。ELISA技术因其高灵敏度、良好的重复性以及操作简便等特点被广泛应用于临床诊断中。