酶活性测定的基本原理是通过检测底物消耗或产物生成的速度来反映酶的催化能力。酶是一种生物催化剂，能够加速特定化学反应而不被消耗。在酶促反应中，底物（S）与酶（E）结合形成不稳定的中间复合物（ES），此复合物随后分解为产物（P）和游离的酶（E）。这个过程可以用以下方程式表示：E S ⇌ ES → E P。

测定酶活性的方法主要分为两大类：
1. 直接法：直接测定底物消耗或产物生成量。例如，可以通过紫外可见分光光度计检测反应过程中某些物质在特定波长下的吸光度变化来计算酶的活性。如果产物或底物本身没有合适的吸收峰，则可以加入显色剂进行间接测量。
2. 间接法：利用其他生化指标的变化来推断酶的活性。例如，测定与目标酶相关的代谢途径中其他物质浓度的变化；或者通过检测辅因子、辅助因子等在反应过程中的变化情况来反映酶的活性水平。

为了准确地测定酶活性，通常需要设定标准条件（如温度、pH值等），并在一定时间内连续监测底物消耗或产物生成的速度。这个速度反映了酶催化该化学反应的能力，即酶活性。此外，在实际操作中还需要注意排除非特异性干扰因素的影响，确保结果的准确性和可靠性。