血清IgG测定方法有多种,以下为您详细介绍:
首先是免疫比浊法,该方法是目前临床上应用较为广泛的一种方法。它的原理是在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成免疫复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,可根据标准曲线计算出样品中IgG的含量。免疫比浊法又可分为透射比浊法和散射比浊法。透射比浊法是测量光线通过反应液时被免疫复合物吸收的程度;散射比浊法则是测量免疫复合物对光线的散射程度。免疫比浊法操作简便、快速,可自动化检测,适合批量标本的检测,但其准确性受反应体系中抗原抗体比例、反应时间等因素影响。
其次是单向免疫扩散法,其原理是将抗体混入加热融化的琼脂中,制成含有抗体的琼脂板,在适当位置打孔后加入待检样品,样品中的抗原向周围扩散,与琼脂中的抗体结合形成沉淀环,沉淀环的直径与抗原含量成正比,通过与已知含量的标准抗原比较,可计算出样品中IgG的含量。单向免疫扩散法操作简单,但敏感度较低,检测时间较长,一般需要24 - 48小时才能观察结果。
再者是酶联免疫吸附试验(ELISA),它是一种基于抗原抗体特异性结合的固相免疫测定方法。可采用双抗体夹心法,将特异性抗体包被在固相载体上,加入待检样品,样品中的IgG与包被抗体结合,再加入酶标记的抗IgG抗体,最后加入底物显色,通过检测吸光度值来确定样品中IgG的含量。ELISA法具有灵敏度高、特异性强、操作相对简便等优点,还可用于检测微量的IgG,但该方法需要特定的仪器设备,且实验过程中可能会出现非特异性反应。
另外还有放射免疫分析法(RIA),它是将放射性核素标记技术与免疫反应相结合的一种方法。用放射性核素标记IgG抗原,与待检样品中的IgG竞争结合有限量的特异性抗体,通过测量放射性强度来计算样品中IgG的含量。RIA法灵敏度极高,但由于使用放射性核素,存在放射性污染的风险,且需要特殊的防护设备和专业人员操作,目前在临床上的应用逐渐减少。
综上所述,不同的血清