瑞氏染色是临床检验中常用的一种染色方法,其原理主要基于物理吸附和化学亲和作用。
从物理吸附方面来看,细胞各种成分均为蛋白质,由于蛋白质是两性电解质,在不同的pH环境中可带电,在偏酸性环境中正电荷增多,在偏碱性环境中负电荷增多。瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。伊红通常为钠盐,在水中离解成带负电荷的伊红阴离子;亚甲蓝在水中离解成带正电荷的亚甲蓝阳离子。这些离子可以与细胞内带相反电荷的物质通过物理吸附作用结合。例如,细胞内的血红蛋白、嗜酸性颗粒等成分带正电荷,它们能与带负电荷的伊红结合,从而使这些成分被染成红色。
从化学亲和作用角度来说,细胞内的不同成分对染料具有不同的亲和力。细胞核内的染色质主要由脱氧核糖核酸(DNA)和碱性蛋白质组成,DNA等物质与碱性染料亚甲蓝有较强的化学亲和力,亚甲蓝可与细胞核中的DNA结合,使细胞核被染成蓝色或蓝紫色。而细胞浆内的成分,如各种细胞器等,其化学组成和性质不同,对染料的结合能力也有差异,从而呈现出不同的染色效果。例如,淋巴细胞的胞浆一般染成蓝色,这是因为胞浆内的成分与染料结合后表现出这种颜色特征。此外,中性颗粒等成分既具有与酸性染料结合的能力,又具有与碱性染料结合的能力,在瑞氏染色中通常被染成淡紫红色。
瑞氏染色的效果还受到pH值的影响。如果染色环境的pH值偏酸,伊红的染色作用会增强,细胞会偏红;如果pH值偏碱,亚甲蓝的染色作用会增强,细胞会偏蓝。因此,在进行瑞氏染色时,需要严格控制染色的条件,包括染色液的pH值、染色时间等,以获得清晰、准确的染色结果,从而为临床诊断提供可靠的依据。