葡萄球菌属的鉴定是临床检验中的重要工作，可从以下多个方面进行。

首先是标本采集，根据不同的感染类型采集合适的标本，如化脓性病灶采集脓汁、渗出液，疑为败血症采集血液，脑膜炎患者采集脑脊液，食物中毒则采集剩余食物、呕吐物和粪便等。

在直接涂片检查方面，取标本涂片，进行革兰染色后镜检。若发现革兰阳性呈葡萄串状排列的球菌，可作初步报告。

分离培养也很关键。血液标本需先经肉汤培养基增菌，再接种于血琼脂平板；脓汁、脑脊液沉淀物可直接接种血琼脂平板，35℃培养18 - 24小时后观察菌落特征。葡萄球菌在血琼脂平板上可形成圆形、凸起、表面光滑、边缘整齐、不透明的菌落，不同菌株可产生不同颜色的色素，多数致病菌株菌落周围还会有透明溶血环。

鉴定试验众多。血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标，致病菌株大多能产生血浆凝固酶，可分为试管法和玻片法。耐热核酸酶试验也是鉴定致病性葡萄球菌的重要依据，致病性葡萄球菌能产生耐热核酸酶，可水解DNA。另外，还可进行甘露醇发酵试验，多数致病性葡萄球菌能发酵甘露醇产酸。同时，还可通过新生霉素敏感试验来区分表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌，前者敏感，后者耐药。还可采用商品化的鉴定系统，如API系统、VITEK系统等，能快速准确地鉴定葡萄球菌属。通过综合运用这些方法，可以较为准确地完成葡萄球菌属的鉴定工作。