厌氧细菌培养方法主要有以下几种：
物理方法方面，厌氧罐法是经典的方法之一。它利用抽气换气的方式，先将罐内空气抽出，再充入氮气、氢气和二氧化碳的混合气体，以达到厌氧环境。罐内放置催化剂，使氢气和残余的氧气结合生成水，进一步降低氧气含量。另外，厌氧手套箱也是常用的物理厌氧培养设备。它是一个完全密闭的大型箱，通过气锁将标本及培养物放入箱内，箱内充以氮气、氢气和二氧化碳的混合气体，操作人员通过手套在箱内进行操作，能为细菌培养提供稳定的厌氧环境。
化学方法中，常用的是焦性没食子酸法。焦性没食子酸在碱性溶液中能迅速吸收氧气，从而创造厌氧条件。将培养物与焦性没食子酸和氢氧化钠溶液共同置于密封容器中，焦性没食子酸与氢氧化钠反应后吸收氧气，使容器内成为厌氧环境。
生物方法主要是利用生物间的共生关系来消耗氧气。例如，将需氧菌和厌氧菌共同培养在一个密闭的容器中，需氧菌生长繁殖过程中会消耗容器内的氧气，从而为厌氧菌的生长创造厌氧环境。在临床检验中，常将葡萄球菌和
破伤风杆菌等共同培养，葡萄球菌作为需氧菌消耗氧气，利于
破伤风杆菌等厌氧菌的生长。
此外，庖肉培养基培养法也较为常用。庖肉培养基中含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽等还原性物质，能吸收氧气，同时肉渣中也含有可吸收氧气的成分。将标本接种于庖肉培养基中，在培养基表面覆盖一层凡士林，可阻止外界氧气进入，为厌氧菌生长提供厌氧环境。不同的厌氧培养方法各有优缺点，在实际应用中需根据具体情况选择合适的方法来培养厌氧细菌。
