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放射免疫分析原理是什么?

放射免疫分析(RIA)是一种将放射性核素测量的高度灵敏性与抗原 - 抗体反应的高度特异性相结合的体外微量分析技术。其原理基于竞争性结合反应。

首先,在放射免疫分析中,有两种关键的物质,即标记抗原(Ag*)和未标记抗原(Ag),它们与有限量的特异性抗体(Ab)发生竞争结合反应。标记抗原是用放射性核素如碘 - 125等对已知抗原进行标记得到的,它和未标记抗原具有相同的免疫活性,能够竞争性地与特异性抗体结合。

当标记抗原、未标记抗原和特异性抗体混合时,由于抗体的结合位点是有限的,标记抗原和未标记抗原就会竞争与抗体结合,形成抗原 - 抗体复合物(Ag - Ab和Ag - Ab)以及游离的抗原(Ag和Ag)。随着未标记抗原量的增加,它与抗体结合的机会增多,标记抗原与抗体结合形成的复合物就会相应减少,而游离的标记抗原则会增多。

通过适当的方法将结合的标记抗原 - 抗体复合物(B)和游离的标记抗原(F)分离,然后分别测量B和F的放射性强度。根据测量得到的放射性强度,可以绘制出标准曲线,该曲线反映了结合率(B/B F)与已知未标记抗原量之间的关系。在实际检测中,将待测样品加入反应体系,同样经过竞争结合反应、分离和放射性测量等步骤,根据测得的放射性强度,从标准曲线上就可以查得待测样品中抗原的含量。

放射免疫分析具有灵敏度高、特异性强、准确性好等优点,广泛应用于激素、药物、肿瘤标志物等多种物质的检测,在临床诊断、医学研究等领域发挥着重要作用。
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