沙门菌属的
微生物学检验方法主要包括标本采集、直接镜检、分离培养、生化试验、血清学鉴定以及分子生物学方法等多个方面。
标本采集是检验的第一步,根据不同的疾病类型和病程采集合适的标本。如疑似伤寒的患者,在发病1 - 2周可取血液,2 - 3周可取粪便和尿液;对于肠炎患者,多采集粪便、呕吐物或可疑食物等。
直接镜检一般先将标本涂片,经革兰氏染色后镜检。沙门菌为革兰氏阴性杆菌,但直接镜检的阳性率较低,只能作为初步的判断依据。
分离培养是关键步骤。血液和骨髓标本需要先增菌培养,常用的增菌培养基有葡萄糖肉汤等。粪便、尿液等标本可直接接种于选择性培养基,如SS琼脂、麦康凯琼脂等。在这些培养基上,沙门菌一般形成无色透明或半透明、边缘整齐的菌落。培养条件通常为37℃需氧培养18 - 24小时。
生化试验用于进一步鉴定分离出的可疑菌落。沙门菌属的典型生化特征为发酵葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气),不发酵乳糖,硫化氢试验阳性,动力试验阳性等。常用的生化鉴定管有糖发酵管、硫化氢试验管、吲哚试验管等。
血清学鉴定是利用已知的沙门菌多价和单价诊断血清,与分离培养得到的纯培养物进行玻片凝集试验,以确定其血清型。这对于沙门菌的分型和流行病学调查具有重要意义。
分子生物学方法近年来也逐渐应用于沙门菌的检验。如聚合酶链反应(PCR)技术,可快速、特异、灵敏地检测标本中的沙门菌核酸序列,尤其适用于早期诊断和大量标本的筛查。
综上所述,通过综合运用这些
微生物学检验方法,可以准确、快速地对沙门菌属进行检测和鉴定,为临床诊断和治疗提供有力的依据。