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尽管不同的细菌对营养的要求不同，但细菌需要的营养物质应含有氮源、碳源、无机盐类和生长因子等，常用的营养物质如下：
1.营养物质：
（1）蛋白胨；（2）肉浸液；（3）牛肉膏；（4）糖类、醇类；（5）血液；（6）无机盐类； （7）鸡蛋和动物血清；（8）生长因子：提供细菌生长繁殖所需要的氮源和碳源，还有生长因子。
2.凝固物质：
制备固体培养基时，需要在液体中加入凝固物质。最常用的凝固物质为琼脂，特殊情况下也可加入明胶、卵白蛋白、血清等。
琼脂是半乳糖胶，98℃以上时可溶于水，在45℃以下则凝固成凝胶状态。
3.抑制剂和指示剂：
在制备培养基时常加入抑制剂和指示剂，并不是细菌繁殖所必需的物质，是用于选择、鉴定及判断结果的需要。
1）抑制剂：抑制剂必须具有选择性抑制作用，在制备培养基时加入一定种类的抑制剂，目的在于抑制非检出菌的生长，从而利于检出菌的生长。抑制剂的种类很多，可根据不同的目的选用不同的抑制剂。
2）指示剂：在培养基中加入一定种类的指示剂，是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚兰、中国蓝等酸碱指示剂。亚甲兰常用作氧化还原指示剂。
