方法名称：

注射用头孢他啶－头孢他啶－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定注射用头孢他啶中头孢他啶的含量。

本方法适用于注射用头孢他啶。

方法原理：

供试品经水溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测头孢他啶的峰面积，计算出其含量。

试剂：

1. 乙腈

2. pH7.0磷酸盐缓冲液

仪器设备：

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按头孢他啶峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 pH7.0磷酸盐缓冲液 水=40 200 1760

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

2.4 流速：1.5mL/min

试样制备：

1. pH7.0磷酸盐缓冲液

称取无水磷酸氢二钠42.59g、磷酸二氢钾27.22g，加水溶解并稀释至1000mL溶解。

2. 对照品溶液的制备

精密称取头孢他啶对照品适量，加水制成每1mL中约含1mg的溶液，摇匀，作为储备液，临用前精密量取15mL，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

取供试品10瓶，分别加水溶解并定量稀释制成每1mL中含头孢他啶1mg的溶液，临用前精密量取15mL，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长254nm处测定头孢他啶（C22H22N6O7S2）的峰面积，计算出其含量，并求出10瓶的平均含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.135。