1． 直接镜检 采用悬滴法：自阴道后穹窿取一滴阴道分泌物与一滴生理盐水在玻片上混匀，置于高倍镜下（100×或400×）检查，若见到卵圆形的，有鞭毛，可运动的寄生虫则可诊断。悬滴法镜检的另一重要发现是阴道分泌物中存在大量嗜中性白细胞。 男性患者采用晨起第一次排尿前的尿道分泌物或晨起第一次尿的沉渣作悬滴法镜检。 2． 滴虫培养 此法较直接镜检更敏感。培养在厌氧环境下孵育至少48小时，若阴性应连续培养7天并定期检查。
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