方法名称:清热解毒口服液-栀子甙的测定-高效液相色谱法
应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定清热解毒口服液中栀子甙的含量。
该方法适用于清热解毒口服液中栀子甙的含量测定。
方法原理:供试品蒸干后,用丙酮溶解,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长240nm处检测栀子甙的吸收值,计算出其含量
试剂:1.乙腈(色谱醇)
2.二次重蒸水
3.丙酮(色谱醇)
4.磷酸
5.乙醇
仪器设备:1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
1.3 紫外吸收检测器
2 色谱条件
2.1 流动相:水 乙腈(45:5);流速:1.0ml/min。
2.2 检测波长:240nm
2.3 温度:室温。
3 超声波发生器
试样制备:1. 对照品溶液的制备
精密称取栀子甙对照品2mg,置100ml量瓶中,加丙酮 水((1:1)溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2. 供试品溶液的制备
精密量取清热解毒口服液10m1于蒸发皿中,置水浴上蒸干,加丙酮溶解,后转入100m1量瓶中,加丙酮至刻度,放入超声发生器中振荡25min( 40℃ ),然后,以0.5μm的滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液。
注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤:分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长240nm处测定栀子甙的吸收值,计算出其含量。
参考文献:中国实验方剂学杂志,反相高效液相色谱法测定清热解毒口服液中栀子甙含量,2000,6(5),p13。