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厌氧菌培养标本

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【参考范围】绝大多数无芽孢厌氧菌均存在于人和动物体内,特别是口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等处,同需氧菌与兼性厌氧菌共同构成机体的正常菌群。例如肠道菌群细菌中99.9%是厌氧菌,皮肤、口腔、上呼吸道、女性生殖道的正常菌群中也有80%~90%是厌氧菌。

【影响因素】1.在一般情况下,应从无正常菌群寄居的部位采集标本,用无菌操作抽取体液标本,包括血液、关节液、心包积液、腹腔积液、胸腔积液和膀胱穿刺液、深部脓肿渗出物、经气管抽取的肺渗出物或直接从肺抽取渗出物以及其它组织穿刺液等。

2.采集标本时绝对不能被正常菌群污染。应尽量避免接触空气,多使用针筒抽取,减少标本与空气接触的机会。

3.做厌氧菌培养,最理想是能取得组织标本,因厌氧菌在组织中比在渗出物中更易生长,而且组织标本可真实反应出感染过程中的细菌学变化。

4.标本采集后要立即送检,送检过程也必须保持在无菌条件下进行,具体方法可以采用用无菌注射器送检(抽取标本后要排尽空气,并将针头插入无菌橡胶塞)、标本充盈法送检(标本装满标本瓶,驱除空气,加盖后产即送检。医学教|育网搜集整理粪便作难辨梭菌培养可用此方法),或用商品化的无氧小瓶送检。

5.在正常情况下,厌氧菌可寄居于皮肤和黏膜,此等部位所培养出的厌氧菌不一定是真正的病原菌,故下列标本无送检价值,不宜做厌氧菌培养:鼻咽拭子、齿龈拭子、痰和气管抽取物、胃和肠道内容物、肛拭、接近皮肤和黏膜的分泌物、褥疮溃疡及黏膜层表面、排出的尿或导尿、阴道或子宫拭子、前列腺分泌物。

【临床意义】1.厌氧菌感染是一种内源性感染,病种遍及临床各科。人体各种器官和组织都可发生厌氧菌感染,大部分是与需氧菌混合感染。常规细菌培养阴性,需考虑厌氧菌感染的可能。即使常规细菌培养阳性,也不能排除厌氧菌混合感染的可能性。

2.厌氧菌感染的临床指征:①感染组织局部产生大量气体,造成组织肿胀和坏死,皮下有捻发音,是产气荚膜梭菌所引起感染的特征;②感染易发生在黏膜及其周围创面上,口腔、肠道、鼻咽腔、阴道等黏膜,均有大量厌氧菌寄生,如果这些部位及其附近有破损,极易发生厌氧菌感染;③深部外伤如枪伤后及人被动物咬伤后的继发感染,均可能是厌氧菌感染;④分泌物有恶臭,或为暗血红色,并在紫外光下发出红色荧光,均可能是厌氧菌感染,分泌物或脓汁中有硫磺颗粒,为放线菌感染;⑤患者的分泌物涂片经革兰染色,镜检发现有细菌,而常规培养阴性,或在液体及半固体培养基深部长的细菌,均可能为厌氧菌;⑥长期应用氨基糖苷类抗生素治疗无效的病例,可能是厌氧菌感染;⑦最近有流产史,以及胃肠手术后发生的感染;⑧常规血培养阴性的细菌性心内膜炎,并发脓毒症血栓性静脉炎,伴有黄疸的菌血症等,应考虑可能有厌氧菌感染。

3.易感因素:①全身免疫功能下降者或慢性病患者,如糖尿病人易并发厌氧菌性胆囊炎、下肢溃疡、蜂窝织炎;晚期肿瘤患者感染发热部分是厌氧菌引起的;接受类固醇激素治疗或使用免疫抑制剂的器官移植及胶原病患者;接受放疗和化疗的患者;慢性肝、肾病晚期,慢性酒精中毒者;严重外伤,包括开放性骨折和大面积创伤;口腔、胃肠和女性生殖道进行大手术而严重损伤机体抵抗力者;老年、婴幼儿和早产儿等免疫功能受损或不足,易并发厌氧菌感染;分娩产程过长,羊膜早破引起羊膜炎和子宫内膜炎者,母子均易发生厌氧菌感染。②局部免疫力下降,并具备厌氧菌感染条件者,如因血管损伤、烧伤动脉硬化、水肿、肿瘤压迫、包扎过紧和有异物等,造成局部组织缺血、低氧、低氧化还原电势,厌氧菌可进入组织大量生长繁殖,导致感染;大面积外伤有需氧菌混合感染,需氧菌耗尽环境中氧气,有利于厌氧菌的繁殖;拔牙或外科手术破坏机体屏障结构,使厌氧菌进人血液。

4.厌氧菌感染的临床:厌氧菌感染以颅内、胸腔、盆腔为多见,占这些部位感染的70%~93%,1/3~2/3为混合感染。临床上常见的厌氧菌感染有如下疾患。

①中枢神经系统感染,如非外伤性脑脓肿、厌氧性脑膜炎:②呼吸系统和胸腔内感染,如吸入性肺炎、坏死性肺炎、肺脓肿、脓胸、上呼吸道感染(扁桃体脓肿、鼻窦炎、慢性中耳炎、乳突炎、咽峡炎);③腹腔内感染,如腹膜炎、肝脓肿、阑尾炎、膈下脓肿、肾脓肿、胆道系统感染、腹腔手术后感染等;④女性生殖系统和盆腔厌氧菌感染,女性生殖道厌氧菌感染很普遍,可引起外阴、阴道感染、子宫内膜炎和子宫积脓、盆腔脓肿、输卵管-卵巢脓肿、妇科术后感染、血栓性盆腔静脉炎、分娩前的羊膜腔炎、感染性流产和产褥感染等;⑤口腔厌氧菌感染,如牙髓炎、根尖周炎、牙周炎、牙龈脓肿;⑥骨和关节感染,如化脓性骨髓炎、化脓性关节炎等;⑦血液及心血管系统的厌氧菌感染,如厌氧菌性败血症、心内膜炎;⑧皮肤和软组织的厌氧菌感染,如坏疽、坏死性蜂窝织炎、慢性窦道性溃疡、口腔面峡部感染、褥疮、烧伤创面感染、肛周脓肿等;⑨新生儿厌氧菌感染,如脐炎、新生儿肺炎、坏死性小肠结肠炎;⑩以外毒素致病的厌氧菌感染,如产气荚膜梭菌感染引起的气性坏疽、食物中毒以及急性出血性坏死性肠炎,破伤风,肉毒症,抗生素相关性肠炎等。

5.美国全国临床实验室标准化委员会(NCCLS)厌氧菌敏感性试验工作组推荐在以下四种情况下有必要进行厌氧菌的敏感性试验:①为了确定新抗生素对厌氧菌的抗菌模式;②在当地医院对厌氧菌的药敏模式进行定期监测;③在各种地理区域对厌氧菌的药敏模式和耐药趋势进行定期监测;④提供特异的药敏试验结果以指导医生对特定患者感染的治疗。厌氧菌药敏试验对特定患者治疗有指导意义的疾病包括:脑部脓肿、脑膜炎、心内膜炎、难治性或周期性菌血症、骨髓炎、化脓性关节炎、人工瓣膜及血管的移植性感染。

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