脑脊液常规检测主要包括蛋白定性、细胞计数及定量测定蛋白质、葡萄糖和氯离子,在医院检验科中是检测量比较少的项目,目前还没有专门的检测仪器,检测方法通常还是手工方法。但尿分析仪、生化分析仪、尿沉渣分析仪及血细胞分析仪发展较快,自动化程度日益增强,本文就使用这些仪器对脑脊液常规进行检测做可行性分析。
1 用尿分析仪测定脑脊液蛋白质
在《全国临床检验操作规程》第2版(以下简称《规程》)中用潘氏试验做脑脊液常规中的蛋白定性检查,其原理是脑脊液中蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉。产生白色浑浊或沉淀。潘氏试验不仅对白蛋白起反应,对球蛋白也起反应,且对蛋白质比较敏感,当总蛋白超过250mg/L,医学教.育网搜集即可呈阳性。尿分析仪法检测蛋白质是采用参考空白及测量波长、参考波长,利用pH指示剂蛋白误差原理,其灵敏度为300mg/L,且只对白蛋白敏感,对球蛋白不敏感。在脑脊液检测中,球蛋白检测意义更大,因为当有脑组织和脑膜疾病时,大多伴有球蛋白增高,而尿分析仪并不能客观地反映出来,而且尿分析仪结果的级差范围较大,与潘氏试验判定结果的分级也不能完全吻合。因此笔者认为脑脊液蛋白质的检测不宜使用尿分析仪。
2 用尿分析仪测定脑脊液葡萄糖
尿分析仪采用干化学法检测葡萄糖,检测范围5~220mmol/L,灵敏度2~5mmol/L,大剂量青霉素、左旋多巴等均可导致假阴性;脑脊液中葡萄糖含量仅为2.5~4.5mmol/L,多数病理情况下更低,用干化学法测定只能在-~+之间,诊断能力较差。对脑脊液葡萄糖测定,在《规程》中已删除葡萄糖半定量试验,用定量检测法取代了半定量法。因此笔者认为脑脊液葡萄糖的检测也不宜使用尿分析仪。
3 用生化分析仪测定脑脊液葡萄糖、蛋白质和氯离子生化分析仪主要是检测血清中的各种成分,而《规程》中脑脊液葡萄糖、蛋白质和氯离子的检测方法与血清基本相同,因此用生化分析仪对脑脊液葡萄糖、蛋白质和氯离子等项目定量测定符合临床需要,既快又准,方法可行。
4 用尿分析仪测定脑脊液中红细胞和白细胞数量
《规程》中用细胞计数板和显微镜,并对不同细胞含量的脑脊液进行适当稀释或不稀释,直接用显微镜目测计数,只能检出有形的细胞成分,而溶解的细胞检测不到;尿分析仪检测红细胞是检测血红蛋白中的亚铁血红素,既对有形的红细胞敏感,又对溶解的红细胞敏感。尿分析仪检测白细胞是检测白细胞酯酶,医.学教.育网搜.集整理这种酶主要在粒细胞的细胞质中含有,淋巴细胞不含有。多数脑、脑膜疾病的脑脊液细胞增多时,不仅仅是粒细胞增多,淋巴细胞也增多,故用尿分析仪试纸法检测会产生低值或假阴性。尿分析仪检测细胞只是半定量,无法准确计数白细胞,更无法对白细胞进行分类,达不到现在临床的要求。因此笔者认为脑脊液红细胞和白细胞计数不宜使用尿分析仪。
5 用UF-100或UF-50计数脑脊液中红细胞、白细胞数量
UF-100或UF-50是利用流式细胞和电阻抗原理开发出来的全自动分析仪。该仪器以激光散射强度、散射宽度、荧光强度、荧光宽度和电阻抗的大小识别计数尿中红细胞、白细胞等颗粒,可以检测到低细胞量的体液标本,脑脊液中有形成分的组成更简单,细胞以外的干扰粒子很少且颗粒总数一般在仪器设定的范围内,这为UF-100或UF-50灵敏而精确地鉴别和计数脑脊液中细胞成分提供了有利条件。用仪器计数细胞数,检测结果客观,不受主观因素的影响,且具有良好的重复性。因此笔者认为用UF-100或UF-50尿沉渣分析仪计数脑脊液细胞数量方法可行。
6 用血细胞分析仪计数脑脊液中红细胞数、白细胞数及分类
血细胞分析仪主要是计数血液中细胞数量的,而多数脑脊液中细胞总数不在仪器设定的范围内,计数误差较大,一般不宜使用;如果脑脊液为血性,可直接用血细胞分析仪测量,或用血细胞分析仪的稀释模式检测,但并不稀释脑脊液,而是把检测结果除以一个系数(这个系数为用稀释模式做血液细胞计数时的稀释倍数)即可,且可以对白细胞进行分类计数。
随着自动化仪器的发展、更新,自动化检测仪器的种类越来越多,本文只对现在较常见仪器的原理进行了分析,对一些特殊仪器,如1991年日本某公司发明的Urine-TP试剂带,它使用类似考马斯亮蓝法,能同时测定白蛋白、球蛋白及本一周氏蛋白,其能否对脑脊液中蛋白质进行检测还有待于进一步研究。一机多用固然是好,但要在保证质量的前提下,正确地开发使用,以更好地为临床提供及时、准确的检验报告。