主要方法为聚蔗糖泛影葡胺分层液(ficoll hypaque)密度梯度离心法。分离人外周血单个核细胞时，通常将分层液的比重配成1.077，肝素抗凝血置分层液上，于水平离心机2000r/min离心20分钟，血液中各种细胞因比重不同而被分开。此外，分层剂还可选用Percoll、Metrizamid及牛血清白蛋白(BSA)等。分离不同动物血中单个核细胞时，对分离液比重的要求各不相同，如小鼠为1.088，大鼠为1.084，马为1.090等。
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