实验前后的准备同GOTT，如已知为糖尿病人则选用馒头餐代替口服葡萄糖。取血同时进行葡萄糖和胰岛素测定。
胰岛素测定过去一般采用放射免疫竞争双抗体-PEG法。用125Ⅰ标记的胰岛素与标本中胰岛素一起竞争结合抗胰岛素抗体上的结合位点，再用第二抗体结合抗胰岛素抗体，以PEG沉淀胰岛素与双抗体的复合物，并测定沉淀物的放射性计数，计数的高低与标本中胰岛素的含量成反比医学教`育网搜集整理。
现在多采用化学发光法。即标本中的胰岛素和包被于固相磁珠或固相上的单克隆抗体及标记有酶或电化学发光物质的单克隆抗体形成双抗体夹心复合物，通过磁场或冲洗除去未反应的标记单克隆抗体，加入酶底物使之显色或通电使电化学发光物质形成激发态并在衰减时发射光子，底物显色强度或发光强度与胰岛素含量成正比。此外还可采用双位点的时间分辨荧光计测定法。
