临床医学检验职称

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IgG4酶联免疫分析的建立及初步应用

  摘 要:用兔抗人IgG4的多克隆抗体(IgG4Ab)包被成固相板,以识别结合待测标本中的IgG4。用生物素标记IgG4Ab得Bio-IgG4Ab;用亲和素标记辣根酶得HRP-A。在已包被IgG4Ab的固相板中加入IgG4标准品(或待测样品),反应、洗涤后,加入Bio-IgG4Ab,反应、洗涤后,加入HRP-A,反应、洗涤后,板上形成IgG4Ab-IgG4-Bio-IgG4Ab-HRP-A复合物,加酶底物显色,用酶标仪在490 nm波长测定OD值,作标准曲线,根据标准曲线,查出标本中IgG4含量。该法测定范围:2.5~200ng/mL,最低检出量2.1ng/mL,批内和批间CV分别8.4%和11.2%。测得血清IgG4含量:青年人(30名)为37.7±2.3ng/mL;30名献血员为42.7±9.9ng/mL,49例重症监护患者明显升高为71.2±9.2ng/mL;49例肺部感染患者明显降低为28.4±9.2 ng/mL。

  结果 表明该法稳定,灵敏度适于检出人血清IgG4水平。

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