取肝素抗凝血经分层液(比重1.077)离心分离单个核细胞,配成一定的浓度加入塑料培养板孔中温育1-3小时,洗去未粘附细胞,然后每孔加入含一定浓度LPS的细胞培养液,继续温育一定时间,收集上清液检测IL-1活性。
IL-1活性最常用的检测法是小鼠胸腺细胞增殖反应。该法原理:IL-1可辅助ConA或PHA等刺激小鼠胸腺细胞的增殖,增殖细胞的DNA合成增加。在细胞培养结束前6小时加入3H-TdR,待培养结束时收集细胞,检测放射性强度,即可判断IL-1活性。由于IL-1能促进小鼠T细胞传代株LBRM-33和EL-4分泌IL-2,当含IL-1待检样品加入上述细胞培养液,则培养上清IL-2增加,医学教|育网|收集整理再用IL-2依赖细胞株测定分泌IL-2的多少,可间接推测样品中IL-1含量。其他IL的生物学检测方法大致相同,增殖反应细胞常采用IL的依赖株。