临床医学检验职称

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葡萄菌属的微生物学检验方法与原理

  1.标本采集:根据葡萄球菌感染所致的疾病不同,可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。(不同疾病采集不同标本)

  2.检验方法及鉴定

  (1)直接镜检:无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液(离心后取沉渣)涂片,经革兰染色后镜检,如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为:“找到革兰阳性葡萄状排列球菌,疑为葡萄球菌”。

  (2)分离培养:血液标本(静脉血约5ml)注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养,迅速摇匀,以防凝固,置35℃,一般于24h后开始观察有无细菌生长,若均匀混浊,溶血及胶胨状生长,则接种于血琼脂,进一步鉴定,若无细菌生长,于48~72h后自行观察(一般以7天为限),并接种血琼脂,以确定有无细菌生长。血液标本也可注入商品血培养瓶培养。

  脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物,通常可直接接种血琼脂。35℃18~24h培养,医学教|育网搜集整理可见直径2~3mm,产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。

  尿液标本,必要时作细菌菌落计数。

  粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板,经35℃18~24h培养,可形成细小菌落,48h后形成典型菌落。

  (3)鉴定试验

   金黄色葡萄球菌  表皮葡萄球菌  腐生葡萄球菌
  触酶  +  +  +
 血浆凝固酶  +  -  -
 甘露醇发酵试验  +  -  -
 新生霉素敏感试验  S  S  R

  (4)耐药性检测:检测耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的表葡菌(MRSE),耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA),耐万古霉素的表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测对苯唑西林耐药的葡萄球菌。

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