相信很多人都想知道可溶性抗原组织和细胞抗原的制备?下面请大家仔细阅读医学教育网编辑专门为您整理的可溶性抗原组织和细胞抗原的制备这篇文章吧。
1.组织和细胞抗原的制备:通常需要先将来源于人和动物的组织和细胞破碎,再经一定的方法纯化,才能获得所需的抗原。细胞破碎方法有:
(1)高速组织捣碎机法;
(2)研磨法(可用组织匀浆器或乳钵)组织匀浆液要离心沉淀,沉淀物为组织和细胞碎片,上清液为提取可溶性抗原的材料。
2.组织细胞或培养细胞可溶性抗原制备:除上述机械捣碎获取外,尚有酶处理法,常用胃蛋白酶或胰酶,可获得游离的单个细胞。
细胞抗原分膜蛋白抗原、细胞质抗原(主要为细胞器)、细胞核与核膜抗原,制备这些抗原前均需将细胞破碎,方法有:
(1)反复冻融法:一般-20℃反复冻融。
(2)超声破碎法:利用超声波机械振动原理使细胞破碎。
(3)自溶法:利用组织、细菌自身酶系统使之裂解。
(4)酶处理法:常用溶菌酶、蜗牛酶、纤维素酶等使细菌或组织裂解。
(5)表面活性剂处理法:常用十二烷基硫酸钠等表面活性剂处理。
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